Jak wiesz, próba kontrolna jest punktem odniesienia, daje możliwość porównania. Różni się od badawczej tym, że nie działa na nią badany czynnik, albo czynnik jest w optimum lub też przeprowadzona jest w warunkach podobnych do naturalnych. Czynnikiem, który miał przeprowadzić reakcję hydrolizy, jest ureaza, która pod wpływem wysokiej temperatury ulega denaturacji, wiec w próbie 4. nie jest aktywna i nie działa. Taką próbę kontrolną nazywamy negatywną, czyli doświadczeniem pomocniczym, przeprowadzonym w identyczny sposób jak doświadczenie właściwe, ale pozbawionym tego czynnika, który wpływa na badany efekt. Kontrolą pozytywną byłaby probówka z optymalnym stężeniem ureazy, ale jeśli nie znamy tego stężenia i badamy jedynie różnice w szybkości reakcji w zależności od stężenia enzymu, to łatwiej posłużyć się kontrolą negatywną, aby porównać próby badawcze z próbą, w której enzym nie wpływał na szybkość reakcji.